طراحی و ساخت سازههای پلاسمیدی مختص انتقال هدفمند ژن به ژنوم کلروپلاستی
نویسندگان
چکیده مقاله:
الحاق ژن خارجی در ژنوم کلروپلاستی از طریق نوترکیبی همتا بین توالیهای مجاور آن ژن در حاملهای کلروپلاستی، رخ میدهد. از آنجایی که شباهت صد در صدی توالی هدفگیریکننده کارایی تراریختی پلاستوم را به طور چشمگیری افزایش خواهد داد، یک جفت پرایمر برای جداسازی این ناحیه طوری طراحی گردید که دارای شباهت صد در صدی در تمامی پلاستومهای گیاهی باشد، ولی طول و توالی ناحیه تکثیری در ژنومهای مختلف متفاوت بود. توالی هدفگیری کننده، از پلاستومهای توتون، پنبه، ذرت، کاهو، گوجهفرنگی، هویج و حتی کلزا و لیموترش که پلاستوم آنها هنوز توالییابی نشده است، جداسازی و کلونسازی گردید. حضور و جهت ناحیه جداشده از پلاستوم گیاهان مختلف و صحت کلونسازی، توسط آنزیمهای مختلف و از جمله HindIII و BamHI مورد تایید قرار گرفت. سپس با افزودن نواحی تنظیمی مختلف شامل پیشبرها و پایانبرهای دائمی کلروپلاستی و القایی، نواحی بدون ترجمه یا UTRهای مناسب، نواحی اتصال ریبوزوم پلاستیدی، جایگاههای آنزیمی مناسبِ ورود ژن برای بیان انفرادی و یا پلیسیسترونی، ژنهای گزارشگر، ژنهای نشانگر انتخابی آنتیبیوتیکی و غیرآنتیبیوتیکی و توالیهایی برای حذف ژن نشانگر پس از انتقال ژن، تلاش شد تا انواع مختلفی از حاملهای کلروپلاستی ساخته شوند تا بتوان بیان هر ژن خارجی را به طور دلخواه در ژنومهای پلاستیدی گیاهان مختلف به صورت کارآمد امکانپذیر نمود که سازههای کلروپلاستی pFNGi، pFNG از جمله آنها بود. این پلاسمیدهای نوترکیب میتوانند به عنوان حاملهای پلاستیدی عمومی و اختصاصی برای انتقال ژن به کلروپلاست استفاده شوند. در این تحقیق نه تنها برای گیاهان مذکور، بلکه برای هر گونه گیاهی دیگری که توالی پلاستومی آن در دسترس نیست نیز حامل پلاستیدی اختصاصی و دارای کارایی بالا تهیه شد.
منابع مشابه
طراحی و ساخت سازه های پلاسمیدی مختص انتقال هدفمند ژن به ژنوم کلروپلاستی
الحاق ژن خارجی در ژنوم کلروپلاستی از طریق نوترکیبی همتا بین توالی های مجاور آن ژن در حامل های کلروپلاستی، رخ می دهد. از آنجایی که شباهت صد در صدی توالی هدف گیری کننده کارایی تراریختی پلاستوم را به طور چشمگیری افزایش خواهد داد، یک جفت پرایمر برای جداسازی این ناحیه طوری طراحی گردید که دارای شباهت صد در صدی در تمامی پلاستوم های گیاهی باشد، ولی طول و توالی ناحیه تکثیری در ژنوم های مختلف متفاوت بود....
متن کاملطراحی و ساخت سازه اختصاصی کلروپلاستی گیاه برنج حاوی ژنهای بتائین آلدهید دهیدروژناز(badh) و فلاودکسین(fld) جهت ایجاد مقاومت به تنشهای غیرزنده
تنشهای غیرزیستی از جمله خشکی و شوری اولین عامل کاهش محصول در دنیا است. در این تحقیق ژن بتائین آلدهید دهیدروژناز (badh) هم به عنوان یک نشانگر غیرآنتیبیوتیکی و هم به عنوان یکی از ژنهای کاندید در تحمل به تنشهای غیرزیستی به همراه ژن فلاودکسین (fld) در ساخت ناقل کلروپلاستی برای گیاه برنج مورد استفاده قرار گرفت. بدین منظور ابتدا دو قسمت از یک ناحیه اختصاصی هدفگیری کننده به پلاستوم برنج (FR) ب...
متن کاملطراحی و ساخت سازه اختصاصی کلروپلاستی گیاه برنج حاوی ژنهای بتائین آلدهید دهیدروژناز(badh) و فلاودکسین(fld) جهت ایجاد مقاومت به تنشهای غیرزنده
تنشهای غیرزیستی از جمله خشکی و شوری اولین عامل کاهش محصول در دنیا است. در این تحقیق ژن بتائین آلدهید دهیدروژناز (badh) هم به عنوان یک نشانگر غیرآنتیبیوتیکی و هم به عنوان یکی از ژنهای کاندید در تحمل به تنشهای غیرزیستی به همراه ژن فلاودکسین (fld) در ساخت ناقل کلروپلاستی برای گیاه برنج مورد استفاده قرار گرفت. بدین منظور ابتدا دو قسمت از یک ناحیه اختصاصی هدفگیری کننده به پلاستوم برنج (FR) ب...
متن کاملمهندسی ژنتیک ژنوم هستهای گیاه برای اختصاصی کردن بیان ژن در کلروپلاست با طراحی و تراریزش سیگما فاکتور هیبرید
سیستمی با قرار دادن پیشبر شوک حرارتی E. coli (groE) در ناقل پلاستیدی و ساخت سیگما فاکتور هیبرید گیاه- باکتری تحت یک پیشبر مختص بافت طراحی گردید تا بتوان بر مشکل کاهش رشد و یا باروری گیاه در انتقال ژن به پلاستید که اغلب به دلیل اثرات تولید دائمی محصول تراژن ایجاد میگردد غلبه نمود. بهطوریکه با ترکیب موتیفهای قسمت پایانة N شبه سیگما فاکتور توتون که دارای توالی نشانه برای ورود به کلروپلاست و م...
متن کاملمهندسی ژنتیک ژنوم هستهای گیاه برای اختصاصی کردن بیان ژن در کلروپلاست با طراحی و تراریزش سیگما فاکتور هیبرید
سیستمی با قرار دادن پیشبر شوک حرارتی E. coli (groE) در ناقل پلاستیدی و ساخت سیگما فاکتور هیبرید گیاه- باکتری تحت یک پیشبر مختص بافت طراحی گردید تا بتوان بر مشکل کاهش رشد و یا باروری گیاه در انتقال ژن به پلاستید که اغلب به دلیل اثرات تولید دائمی محصول تراژن ایجاد میگردد غلبه نمود. بهطوریکه با ترکیب موتیفهای قسمت پایانة N شبه سیگما فاکتور توتون که دارای توالی نشانه برای ورود به کلروپلاست و م...
متن کاملساخت سازه چندمنظوره کلروپلاستی برای ایجاد گیاهان تراریخته تولیدکننده بیوپلیمر زیست تخریب پذیر و مقاوم به شوری، خشکی و سرما
چکیده هدف از تحقیق حاضر طراحی و ساخت ناقلین اختصاصی انتقال و بیان کلروپلاستی ژن های تولید کننده بیوپلیمر و ایجاد تحمل به تنش های غیرزنده بود. بدین منظور سه ژن درگیر در مسیر بیوسنتزی پلی هیدروکسی بوتیرات جداسازی شد و صحت جداسازی و عملکردی بودن ژن ها پس از بیان در وکتور بیانی و تولید باکتری نوترکیب تولیدکننده ی phb اثبات گردید. سپس یک کاست بیانی القایی برای این گروه ژنی تحت پیشبر groe و پایان...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 14 شماره 3
صفحات 218- 234
تاریخ انتشار 2012-10
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023